Cellfie é um sistema eficiente e preciso para a entrega do extrato de Thymus vulgaris (tomilho) para atuar sobre os adipócitos na estimulação do lipo-preenchimento da pele e rugas de forma não invasiva, promovendo um notável rejuvenescimento com aparência natural.
Tem como objetivo melhorar o envelhecimento estrutural devido à lipoatrofia ou perda de tecido adiposo.
FUNÇÃO: anti-idade
- ATIVOS: Cellfie
- INCI NAME: Water (and) Propanediol (and) Lecithin (and) Glycerin (and) Thymus Vulgaris (Thyme) Flower/Leaf Extract
Mecanismos de ação do Cellfie
Tecido adiposo
O tecido adiposo é extremamente complexo e, sua principal função é regular e coordenar a homeostase da energia, incluindo a coordenação e controle de uma série de processos fisiológicos no organismo, como por exemplo, o metabolismo da glicose, o apetite, as respostas imunológicas e inflamatórias, a angiogênese, etc.
Esse tecido é formado predominantemente por células chamadas adipócitos, que durante seu desenvolvimento passam pelos complexos processos de determinação e diferenciação até se tornarem células maduras, caracterizando o processo conhecido como adipogênese1.
Adipogênese
A adipogênese descreve o processo pelo qual os progenitores adiposos se diferenciam em células que possuem a capacidade de armazenar excesso de energia como lipídeo neutro (triacilglicerol) e liberá-lo como ácidos graxos não esterificados e glicerol quando as demandas do corpo aumentam durante a fome ou o exercício1.
Neste processo, os adipócitos também desencadeiam sinais para recrutar mais progenitores e reiniciar o processo de adipogênese1.
Tipos de tecido adiposo
Existem dois tipos de tecido adiposo bem estudados nos mamíferos: o tecido adiposo branco (TAB) e o tecido adiposo marrom (TAM). Recentemente, um terceiro tipo de tecido adiposo tem sido investigado, chamado tecido adiposo bege2.
O TAB é o tecido adiposo predominante em adultos, sendo distribuído por todo o corpo e encontrado principalmente na camada subcutânea. Ele é responsável por estocar energia extra como triglicerídeos e por secretar hormônios e citocinas, chamadas adipocinas, que regulam a função de diversos tecidos1,2.
Já o TAM é o tecido responsável por dissipar a energia gerando calor, e é localizado em bolsas nas regiões paravertebral, supraclavicular e periadrenal1,2.
O adipócito branco maduro armazena os lipídeos em uma única e grande gota que ocupa de 85-90% do citoplasma e empurra o núcleo e uma fina camada de citosol para a periferia da célula3.
Estes adipócitos são responsáveis pelo armazenamento de 80% da gordura corporal e dos depósitos subcutâneos1.
Já os adipócitos marrons contêm várias pequenas gotículas de lipídeos no seu interior e uma grande quantidade de mitocôndrias que podem converter energia química em calor2.
O adipócito bege é morfologicamente semelhante ao marrom e também é caracterizado pela capacidade de gasto de energia através da termogênese4.
Os adipócitos marrons estão presentes em regiões anatomicamente distintas dos adipócitos brancos (principalmente interescapular em bebês e, paraespinhal e supraclavicular em adultos), enquanto os adipócitos bege são encontrados juntamente no TAB (principalmente em depósitos subcutâneos)4.
Apesar das diferenças de localização e função entre os adipócitos brancos, marrons e beges, os três tipos de células compartilham muitos recursos de diferenciação, sendo regulados por diversos fatores durante a adipogênese.
Adipogênese e sua regulação
Conforme já mencionado, a adipogênese é considerada um processo dinâmico, que pode ser dividido em duas fases: a primeira é chamada de fase de determinação ou comprometimento, e a segunda é conhecida como fase de diferenciação dos adipócitos1,2.
Na primeira fase, ocorre a diferenciação das células multipotentes (células progenitoras tronco) em préadipócitos.
Na segunda fase ocorre a proliferação dos pré-adipócitos (expansão clonal) que, então, geram os adipócitos maduros (Figura 1). Estes eventos celulares são controlados por diferentes mediadores moleculares, os quais podem ser alvos específicos para induzir ou inibir a adipogênese4.
Quando as células-tronco multipotentes geram os pré-adipócitos, há a participação das vias de sinalização Wnt que são uma família de glicoproteínas secretadas por mecanismos parácrinos e autócrinos.
O aumento da expressão da via Wnt, por meio do gene Wnt1 reprime a adipogênese, enquanto sua inibição promove a indução dos fatores de transcrição chaves deste processo, que são os fatores C/EBPα e PPARγ4.
Na diferenciação dos adipócitos, os fatores de transcrição C/EBPβ e C/EBPδ são ativados e, em seguida, ativam os fatores de transcrição C/EBPα e PPARγ. Estes, por sua vez, induzem a transcrição de vários genes relacionados a este tipo celular e o armazenamento de lipídeos, como as enzimas ácido graxo sintase, lipoproteína lipase, lipina 1, acil-CoA diacilglicerol aciltransferase 1 (DGAT1), além das proteínas transportadoras de lipídeos como a proteína FABP4 e hormônios.
A adiponectina, por exemplo, está relacionada com a proliferação e diferenciação dos adipócitos além do aumento do conteúdo lipídico2,5.
Os receptores ativados por proliferadores de peroxissoma (PPARs) são um grupo de três isoformas de receptores nucleares, PPARγ, PPARα e PPARδ , codificadas por genes diferentes.
PPARs são fatores de transcrição regulados por ligantes que controlam a expressão gênica por ligação a elementos de resposta específicos (PPREs)6.
Sob atuação de agonistas (ativadores), a conformação do PPAR é alterada e estabilizada, criando um sítio de ligação, com posterior recrutamento de coativadores transcricionais, resultando em aumento na transcrição gênica5,6.
Os ligantes endógenos do PPAR ainda não são totalmente conhecidos, contudo vários metabólitos de lipídios, incluindo ácidos graxos poli-insaturados e eicosanoides têm sido apontados como ligantes desses receptores, que funcionam, portanto, como sensores lipídicos e reguladores do metabolismo lipídico6,7.
Comprovando sua importância no metabolismo lipídico, estudos in vivo demonstram que a deleção de PPARγ específica de adipócitos bloqueia a obesidade induzida por dieta rica em gordura, ao suprimir a diferenciação de adipócitos e inibir o aumento do conteúdo lipídico8.
Já a adiponectina (também conhecida como: ACRP30, apM1, adipoQ e GBP28) é um hormônio produzido exclusivamente por células do tecido adiposo. Esta proteína é dramaticamente regulada durante a adipogênese e continua sendo um dos produtos gênicos mais específicos dos adipócitos identificados até o momento9.
Além disso, assim como outras adipocinas, ela é altamente expressa e secretadas por adipócitos maduros, o que a torna um excelente biomarcador no processo de aumento de tecido adiposo8.
A adiponectina é conhecida por ser regulada por vários fatores de transcrição, como por exemplo, PPARγ, (C/EBP)α e proteína de ligação do elemento regulatório de esterol 1c (SREBP1c)7,9.
Estudos revelam que ligantes de PPARγ, endógenos ou exógenos, podem induzir a expressão do gene da adiponectina10, sendo, portanto, ambos biomarcadores chaves da adipogênese.
A adiponectina atua de maneira autócrina e parácrina no tecido adiposo e de maneira endócrina nos tecidos distais.
Em experimentos envolvendo adipócitos superexpressando adiponectina, a diferenciação celular foi acelerada9,11.
Além de promover a proliferação e diferenciação celular de pré-adipócitos em adipócitos, a adiponectina pode aumentar o conteúdo lipídico e a responsividade insulínica do sistema de transporte de glicose nestas células9.
Adipogênese e o envelhecimento
A relação entre o aumento do tecido adiposo e a redução de rugas é intuitiva. Ela pode ser comparada aos efeitos dos procedimentos de injeção de preenchedores, como ácido hialurônico por exemplo, que é um paradigma dos procedimentos de rejuvenescimento facial12.
De fato, o mercado de preenchedores faciais alcançou USD 3.5 bilhões em 2018, sendo projetado crescimento de 8% até 2026, onde o ácido hialurônico está presente em 77% deste mercado13.
O sucesso das técnicas de preenchimento pode estar associado a uma teoria recente do envelhecimento cutâneo, que relaciona a aparência de pele envelhecida com a perda de volume do tecido adiposo (lipoatrofia)14.
De fato, estudos demonstram que quanto maior é a lipoatrofia da face, mais ela parece envelhecida15.
Portanto, o preenchimento de tecidos moles e o enxerto de gordura podem ser métodos válidos para combater os sinais de envelhecimento facial16.
Uma alternativa não invasiva e tão eficaz quanto estas injeções pode ser alcançada com o desenvolvimento de produtos capazes de estimular a adipogênese.
A ativação e proliferação de células do tecido adiposo, e expansão de adipócitos maduros, desempenham um papel crucial no aumento de volume de tecidos como a pele16, portanto, a constante manutenção do tecido adiposo pela aplicação de substâncias pró adipogênese pode evitar ou ainda remediar os sinais da idade.
CELLFIE
Cellfie é uma alternativa não invasiva para os preenchedores da pele injetáveis, um ingrediente vegetal com sistema preciso e eficiente de delivery para estimular a adipogênese através do estímulo da adiponectina de forma a amenizar os sinais de envelhecimento.
É constituído pela associação sinérgica de extrato de Thymus vulgaris (tomilho) com fosfatídeos, triglicerídeos e ácidos graxo de lecitina.
O tomilho é comumente cultivado e usado em muitos países principalmente como tempero de alimentos e fonte de óleo essencial usado em indústria alimentícia, em cosméticos e para uso médico17.
Possui uma longa história de uso na medicina tradicional de muitos países, como China e Índia onde é usado para tratamento de doenças respiratórias (tosse, bronquite e asma), dor de dente, infecção do trato urinário, dispepsia e problemas de pele tais como pele oleosa, acne, dermatite e picadas de insetos18-19.
A reputação do tomilho como curador e protetor remonta a milhares de anos. Na era romana, o costume determinava comer tomilho antes ou durante uma refeição, uma vez que ele o protegeria de venenos. Por razões óbvias, isso fez da erva um favorito particular dos imperadores.
Dizia-se que mesmo um banho em água morna administrado generosamente com tomilho poderia interromper os efeitos do veneno depois de consumido inadvertidamente20.
Tomilho também já foi associado com coragem, bravura e força nos tempos antigos. Os soldados romanos trocavam raminhos de tomilho como sinal de respeito. Gregos e romanos queimaram feixes de tomilho para purificar seus templos e lares e evocar um espírito de coragem naqueles que o inalaram.
A associação com coragem e bravura persistiu na Idade Média. O tomilho era um presente tradicional oferecido aos homens que entravam em batalha. Quando usado na batalha, o tomilho poderia ter um segundo propósito: usado como uma erva de embalsamamento desde os tempos dos egípcios, pensava-se que era uma ajuda poderosa para aqueles que passavam para a próxima vida20.
Os vitorianos deram seu próprio toque fantasioso às propriedades místicas do tomilho. Eles consideraram um pedaço de tomilho selvagem na floresta como um sinal claro e incontestável de que as fadas haviam dançado a noite toda naquele mesmo local. Mas os vitorianos também tinham usos mais prosaicos para o tomilho.
Muito antes dos processos fisiológicos da infecção de feridas ser totalmente compreendida, as enfermeiras do século XIX banhavam ataduras com uma diluição de tomilho na água20.
Estes usos medicinais podem estar relacionados à composição química do tomilho que contém numerosos compostos fenólicos, especialmente timol, carvacrol, ácido trans cinâmico, rutina e ácido clorogênico21.
Além disso, no tomilho selvagem, muitos outros compostos fenólicos abundantes foram descritos, como derivados do ácido cafeico e rosmarínico22.
Esta rica composição do tomilho indica seu potencial como agente regulador da diferenciação de adipócitos.
Estudos demonstraram que a rutina aumenta significativamente a acumulação lipídica e a expressão de fatores de transcrição, como o PPARγ, (C/EBP)α, e proteína de ligação a ácidos graxos de adipócitos (FABP4)23.
Além disso, a rutina também aumentou a expressão da adiponectina, além de estimular sua secreção na diferenciação dos adipócitos23.
Outros componentes do tomilho que podem ser relacionados a regulação da adipogênese é o ácido clorogênico e o trans-cinâmico uma vez que promove a diferenciação de adipócitos por atuar como potencial agonista do PPARγ e, estimular a secreção de adiponectina, respectivamente.
Já a lecitina é uma mistura complexa de fosfatídeos, que consiste principalmente em fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina e fosfatidilinositol combinados com diferentes quantidades de outras substâncias, como os triglicérides e ácidos graxos.
A molécula de lecitina é anfipática, ou seja, possui uma porção de ácido graxo, que é atraída por moléculas lipofílicas, e uma porção de ácido fosfórico, que é atraída por substâncias hidrofílicas.
Por esse motivo, as moléculas de lecitina se organizam na fronteira entre líquidos imiscíveis,
como óleo e água. Esse arranjo reduz a tensão interfacial entre óleo e água e produz emulsões relativamente estáveis.
A estrutura molecular única da lecitina desempenha funções versáteis. Tem uma grande variedade de papéis nas indústrias farmacêutica, de cosméticos e de alimentos como emulsificante, modificador de viscosidade, estabilizador, solubilizador e intensificador de penetração24.
Todas estas propriedades da lecitina foram levadas em consideração para a escolha dela como componente do sistema de delivery deste produto. Além disso, a lecitina de origem vegetal (de soja) foi cuidadosamente selecionada para não apresentar organismos geneticamente modificados (GMO), sendo considerada GMO-free.
Testes
1. Eficácia In Vitro do Cellfie
1.1. Estímulo de Produção de PPARγ
Para avaliar o potencial do Cellfie em estimular a expressão gênica do PPARγ, pré-adipócitos diferenciados dos fibroblastos 3T3-L1 (banco de células do Rio de Janeiro, Brasil) utilizados.
Após 24 horas de cultivo à 37°C na presença de 5% de CO2, as células foram incubadas por mais 24 horas com 0,156% (m/v) de Cellfie.
Em seguida, os lisados celulares foram coletados para posterior extração de RNA e avaliação da expressão gênica por PCR em tempo real (RT-PCR).
O RNA total foi extraído usando o Mini Kit PureLink RNA (Life Technologies) e quantificado por espectrofotometria usando NanoDrop Lite (Thermo Scientific). O ensaio de RT-PCR foi realizado no equipamento StepOnePlus (Applied Biosystems).
Para análise da expressão do gene PPARγ, foi utilizado um sistema de teste disponível comercialmente (TaqMan Assays Gene Expression; PPARG: Mm00440940_m1, Applied Biosystems) com os iniciadores e sondas apropriados. O ensaio foi realizado usando o kit de 1 etapa TaqMan RNA-to-CT (Applied Biosystems). A quantidade relativa de mRNA foi calculada conforme descrito em publicações científicas25,26.
A expressão gênica foi considerada relevante (ou significativa) quando valores obtidos no
experimento foram superiores a 1,5 vezes em relação ao controle
Cellfie foi capaz de aumentar significativamente (p<0,01) em 104% a expressão gênica de PPARγ quando comparada ao grupo controle, demonstrando influenciar positivamente o processo de adipogênese.
1.2. Estímulo de Adiponectina
Para detectar a indução da Adiponectina, pré-adipócitos diferenciados de fibroblastos 3T3-L1 (Cell Bank do Rio de Janeiro, Brasil) foram semeados em placa de 24 poços e cultivados em atmosfera úmida, a 37°oC na presença de 5% de CO2, utilizando meio de cultura específico até diferenciação completa.
As culturas celulares foram, então, incubadas com concentrações não citotóxicas de Cellfie e um produto de mercado (benchmark), por 7 dias, para posterior coleta do sobrenadante e avaliação do parâmetro proposto.
Os níveis de adiponectina foram quantificados no sobrenadante das células 3T3-L1 usando um kit de ensaio imunoenzimático comercialmente disponível (ELISA sandwich) (R&D Systems, EUA).
O anticorpo monoclonal de captura anti-adiponectina foi adicionado à placa de 96 poços que foi então incubada por 12 horas.
As amostras foram adicionadas e a placa foi incubada por 2 horas. O anticorpo de detecção anti-adiponectina foi então incubado por mais 2 horas. Uma solução de estreptavidina peroxidase foi adicionada e incubada por 1 hora.
Finalmente, a solução de substrato (H2O2 e TMB-tetrametilbenzidina) foi adicionada à placa. A reação de coloração foi interrompida pela adição de H2SO4 2N e a leitura foi realizada em um leitor de microplacas a 450 nm.
Os níveis de adiponectina foram expressos em pg/mL, calculados a partir dos valores de referência obtidos com uma curva padrão construída com concentrações conhecidas de adiponectina.
Cellfie demonstrou regular positivamente a adiponectina em 122% em relação ao controle sendo significativamente superior ao benchmark cuja regulação representou aumento de apenas 27% deste relevante hormônio regulador da adipogênese. Importante notar que Cellfie apresentou superioridade de eficácia.
1.3. Indução de Adipogênese
Pré-adipócitos diferenciados de fibroblastos 3T3-L1 (Cell Bank do Rio de Janeiro, Brasil) foram semeados em placa de 24 poços e cultivados em atmosfera úmida, a 37°C na presença de 5% de CO2, utilizando meio de cultura específico até diferenciação completa.
As culturas celulares foram, então, incubadas com concentrações não citotóxicas de Cellfie e um produto de mercado (benchmark), por 7 dias, para avaliação do parâmetro proposto.
Como controle da indução da adipogênese foi utilizado IBMX (isobutil metil xantina). As células foram então coradas com o corante AdipoRed, que tem a propriedade de se ligar aos lipídios intracelulares, por 15 minutos. Imediatamente, as imagens foram gravadas por microscopia óptica de fluorescência (DM1000, Leica), a fim de avaliar qualitativamente o aumento da adipogênese em comparação com os grupos controle e produto de referência (benchmark).
Ao avaliar a intensidade da coloração, podemos perceber que Cellfie foi capaz de induzir a adipogênese de forma superior ao benchmark já que foi testado em uma concentração 10X inferior à ele, demonstrando eficácia significativa no acúmulo de gordura nos pré-adipócitos.
2. Eficácia In Vivo do Cellfie
A avaliação clínica do Cellfie foi realizada com mulheres de 40 a 60 anos sendo que 2 grupos de 20 voluntárias/cada foram submetidos a tratamento tópico na face e no pescoço duas vezes ao dia por 60 dias com uma formulação gel placebo ou uma formulação gel com 2% de Cellfie.
Dos 20 voluntários iniciais por grupo, finalizaram o estudo 18 voluntários no grupo que utilizou a formulação placebo e 19 voluntários no grupo que utilizou a formulação contendo Cellfie.
As áreas avaliadas para eficácia na redução das rugas foram: rugas periorais, pés de galinha (rugas periorbitais), linhas de sorriso e nasolabiais.
Para avaliação das rugas, diferentes imagens 2D foram obtidas através do scanner de luz estruturada Bio3D antes do início do tratamento (dia 0), após 30 dias de tratamento (dia 30) e após 60 dias de tratamento (dia 60). As imagens foram processadas para gerar reconstruções 3D, e três parâmetros (área total, comprimento e profundidade das rugas) foram obtidos para cada voluntário em cada uma das áreas.
Além disso, foi analisado o volume de contorno da face. As análises ocorreram nos dias: 0 (antes do tratamento), 30 (após 4 semanas de tratamento) e 60 (após 8 semanas de tratamento), utilizando o equipamento Bio3D Structured-scanner de luz.
Para o volume de contorno da face, foram tiradas diferentes imagens 2D das áreas da face e pescoço para cada um dos voluntários em cada um dos pontos no tempo.
As reconstruções em 3D foram obtidas a partir dessas imagens 2D e comparadas (Dia 0 x Dia 30 e Dia 0 x Dia 60).
2.1. Cellfie tem eficácia objetiva na redução de rugas
Cellfie reduziu de forma significativa após 60 dias a área, comprimento e profundidade das rugas periorais em 7%, 10% e 4,5%, respectivamente (Figura 7) em comparação ao D0.
Em 30 dias, Cellfie já apresentou redução significativa de 2% na profundidade das rugas periorais.
Nas imagens de reconstrução 3D obtidas para a região perioral, percebe-se significativa redução da área, comprimento e profundidade das rugas, obtendo-se resultados máximos de redução de 28%, 30% e 9%, respectivamente.
Já no caso das rugas periorbitais, Cellfie foi capaz de reduzir significativamente a área, comprimento e profundidade deste tipo de rugas a partir de 30 dias com redução de 4,5%, 6% e 3% em relação ao D0, respectivamente.
Em 60 dias, Cellfie apresenta resultados ainda melhores reduzindo 9%, 11% e 4% a área, comprimento e profundidade das rugas periorbitais em comparação ao D0.
A região periorbital apresentou resultados máximos de 27%, 29% e 9,5% nos parâmetros área, comprimento e profundidade conforme resultados obtidos pelas reconstruções 3D.
Cellfie também apresentou resultados significativos após 60 dias na redução do comprimento e na profundidade das linhas do sorriso em 10% e 4%, respectivamente. Neste caso, os melhores resultados obtidos reduziram em 60%, 47% e 29% a área, cumprimento e profundidade das linhas de sorriso conforme observado na reconstrução 3D.
Finalmente, durante a avaliação das linhas nasolabiais, uma redução no comprimento de 5% foi significativamente aferida após 30 dias culminando em 9% de redução significativa após 60 dias.
Na reconstrução 3D foram reportados resultados máximos de redução de 23%, 25% e 8% na área, comprimento e profundidade, respectivamente.
Os resultados de preenchimento das rugas nas quatro regiões avaliadas podem ser facilmente evidenciados nas documentações fotográficas obtidas durante o estudo, corroborando a excepcional eficácia do produto.
2.2. Cellfie tem eficácia objetiva no contorno do rosto
Imagens 2D dos voluntários foram obtidas e processadas para gerar as reconstruções 3D. As
reconstruções 3D dos tempos 0 e 30 dias, e do tempo 0 e 60 dias, foram sobrepostas e cujas diferenças podem ser verificadas para ambos os lados da face.
Podemos perceber que, em geral, Cellfie é capaz de modificar o contorno facial através do estímulo do preenchimento.
As eventuais reduções de volume podem ser explicadas pela mudança do referencial devido ao preenchimento da pele em regiões próximas ou diferenças anatômicas individuais (maior ou menor lipoatrofia).
De qualquer forma, Cellfie demonstrou ser uma alternativa definitiva aos preenchimentos invasivos disponíveis no mercado.
Benefícios Cellfie
- atua na indução da adipogênese através da expressão da adiponectina e PPARγ para induzir o preenchimento da pele reduzindo os sinais do envelhecimento;
- reduzindo em 60 dias a área, comprimento e profundidade das rugas periorais em até 28%, 30% e 9%, respectivamente;
- reduzindo em 60 dias a área, comprimento e profundidade das rugas periorbitais (pés de galinha) em até 27%, 29% e 9,5%, respectivamente;
- reduzindo em 60 dias a área, comprimento e profundidade das linhas do sorriso em até 60%, 47% e 29%, respectivamente;
- reduzindo em 60 dias a área, comprimento e profundidade das linhas nasolabiais em até 23%, 25% e 8%, respectivamente;
- melhorando e modificando o contorno facial através do estímulo do preenchimento, sendo uma alternativa definitiva aos preenchimentos invasivos disponíveis no mercado.
Indicação Cellfie
- Anti-idade de alta eficácia, com inflluência na adipogênese
- Reduz os sinais do envelhecimento cutâneo
- Reduz o comprimento e profundidade das rugas periorais
- Reduz o comprimento e profundidade das rugas periorbitais
- Melhora do contorno facial, com ação de preenchimento
Farmacotécnica
- Dispersável em água. Adicionar Cellfie no final do processo à temperatura ambiente.
- pH: 5,5-7,0
- Géis, emulsões e séruns com benefícios anti-envelhecimento
- O produto é composto de um sistema de delivery lipossomado. Importante considerar que o uso de tensoativos em altas concentrações pode desestruturar o sistema de delivery diminuindo/impactando na eficácia do produto. Portanto, recomenda-se evitar formulações com a presença de etanol ou altas concentrações de tensoativos.
- Estabilidade e compatibilidade: Alta concentração de Tensoativos ou etanol.
Recomendações de uso
2% (p/p)
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Informe técnico do fabricante Chemyunion Ltda
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